I. CÁC TÍNH NĂNG KỸ THUẬT CỦA HỆ THỐNG:
* Công suất hệ thống: > 360 mẫu /24 giờ
* Số lượng mao quản sử dụng: >= 8 capillary, capillary có phủ trong, với một hệ thống gắn liền dễ dàng lắp đặt.Có thể khả năng nâng cấp từ 8 mao quản lên 24 mao quản.
- Chiều dài mao quản 36 cm và 50 cm hỗ trợ cho nhiều ứng dụng và các chương trình chạy khác nhau
- Mao quản 50 cm được tối ưu với nhiều ứng dụng sử dụng với 1 loại polymer POP-7™ và các modules chạy tương ứng.
- Tuổi thọ của mao quản 3500 trung bình >160 lần chạy mẫu
* Hệ thống đổ gel trên cột tự động:
-Tiết kiệm được polymer do ống đường dẫn polymer giữa bơm và túi polymer được thiết kế mỏng
- Hệ thống 3500 bao gồm 3 loại polymer : POP 7 , POP 6 và POP 4 được thiết kế dạng túi để sẵn sàng lắp đặt và chạy mẫu
- Hầu hết các ứng dụng đều có thể chạy với polymer POP7 và mao quản với chiều dài 50 cm
* Buffer và vật tư tiêu hao
- Hệ thống giải trình tự 3500 có Cathode Buffer, Anode Buffer và hoá chất chuẩn được thiết kế sẵn và lắp đặt vào chạy mẫu ngay.
- Khay chứa buffer, chất chuẩn sẽ được bỏ đi khi số lượng mẫu tối đa và đã chạy hoàn tất.
+ Buffer cực dương ( CBC):
+ Buffer cực âm( ABC)
+ Túi chuẩn hoá
* Bộ nạp mẫu tự động:
Cho phép lấy mẫu tự động từ cả hai loại khay chứa mẫu: khay 96 mẫu và khay 384 mẫu
- Hệ thống 3500 thiết kế sử dụng cho dạng plate 96-well Fast và 8- tube chuẩn hoặc Fast strip.
* Chất nhuộm:
- Khả năng phân tích đoạn DNA được nâng cao với 6 màu huỳnh quang.
* Nguồn Laser:
- Dùng nguồn laser dạng rắn kích thích ở bước sóng đơn 505nm, tuổ thọ dài
* Detector thu nhận tín hiệu:
CCD (Charge Couple Device) camera
* Hiệu điện thế:20 kV
Thiết kế sẵn các chương trình dưới dạng các module sẵn
* Môi trường hoạt động:
Nhiệt độ: 15°C–30°C
(Nhiệt độ phòng không nên dao động hơn ±2°C trong suốt thời gian chạy máy)
Độ ẩm: 20–80% ( không dẫn nhiệt)
* Nguồn điện:
- 100–240 V ±10%
- 50–60 Hz ±10%
* Kích thước:
- Dài ( cửa đóng): 61 cm
- Dài ( cửa mở): 122 cm
- Sâu: 61 cm
- Cao: 72 cm
- Nặng: 82 kg
Nhận dạng bằng tầng số vô tuyến ( RFID) nhãn:
- Hệ thống 3500 gắn RFID trên nhãn của mao quản, túi polymer, tray chứa buffer và túi đựng dung dịch chuẩn hoá máy.
- Những nhãn này cho phép theo dõi và báo cáo thời hạn sử dụng, lot, part number, ngày hết hạn và thời gian sử dụng trên máy.
* Chiều dài đoạn đọc được: > 950 base
Độ chính xác: >90 %
Thời gian chạy chương trình liên tục : 24 giờ
II.Phần mểm điều khiển và phân tích:
1.Phần mềm thu nhận tín hiệu:Dễ dàng thiết đặt các thông số về ứng dụng Sequencing và Fragment cũng như các ứng dụng chuyên biệt trên cùng một plate loại 96 well hoặc plate loại 384 well.
2. Các phần mềm phân tích lựa chọn:
2.1. Sequencing Analysis Software with KB™ Basecaller v1.4.1:phân tích trình tự, điều chỉnh base, báo cáo và in kết quả
- QV - Quality Value (được xác định bằng thuật toán KB basecaller): là thông số thể hiện độ tin tưởng của base đọc được. Cho phép dễ dàng đánh giá hiệu quả của quá trình đọc trình tự. được tính toán bằng thuận toán KB basecaller
- Clear Range: biểu hiện phạm vi các base đọc được trong đó mức độ tin tưởng cao nhất
- Mixed Base: các base chưa thể xác định chính xác là base nào
Phần mềm cho phép người sử dụng có thể tự chỉnh sửa các base (thay đổi thành base khác, chèn thêm hoặc cắt bớt base) để có được kết quả đọc trình tự chính xác nhất.
Kết quả phân tích từ phần mềm này có thể được lưu trữ thành các định dạng (format) khác nhau như định dạng ABI (.seq), FASTA (.seq), Phred (.phd.1) và dạng đồ hoạ chuẩn.
2.2.GeneMapper® Software : phân tích microsatellite, LOH, SNP, MLPA, AFLP và t-RFLP
- Xác định kích thước chính xác của các fragment
# Phân tích kết quả của các ứng dụng phân tích đoạn (không dựa trên STR - Short Tandem Repeat) như các ứng dụng
AFLP analysis - phân tích nhận dạng quẩn thể hoặc cá thể thông qua tính đa hình chiều dài của của các đoạn được nhân lên
# Phân tích kết quả cho các ứng dụng phân tích đoạn dựa trên microsatellite (STR - Short Tandem Repeat) dùng cho nhận dạng quần thể, cá thể.
LOH - Loss of heterozygosity. Được ứng dụng trong xác định trạng thái dị hợp tử của gene đột biến (ví dụ như gen làm phát sinh khối u - tumor suppressor gene)
Phân tích đột biến nhiễm sắc thể: hội chứng down,... bằng bộ kit của Aneufast
2.3.Variant Reporter™ Software :đột biến SNP, so sánh trình tự, xác nhận lại trình tự
2.4.SeqScape® Software : dùng để so sánh với các trình tự trong thư viện
2.5.MicroSEQ® ID Analysis Software : trong định danh vi sinh vật sử dụng kit MicroSEQ®
III.HOÁ CHẤT
Hệ thống giải trình tự gen 3500 có thể sử dụng với các bộ kit như sau:
- Bộ kít BigDye® Terminator v1.1 and 3.1 Cycle Sequencing
- GeneScan™ LIZ® Size Standards
- GeneScan™ ROX™ Size Standards
- Một số kit ứng dụng chuyên dụng